? 乐投letou生物报路：蛋白质的化学建饰可改善蛋白的理化性质，，，，， ，，赋予蛋白新的生理学职能，，，，， ，，好比耽搁半衰期、象征靶标受体、调节蛋白-蛋白相互作用等，，，，， ，，在生物技术及药学钻研中拥有沉要的意思。。。。 。。相较于蛋白质氨基酸侧链及N端建饰技术的蓬勃发展，，，，， ，，蛋白质C端建饰战术仍比力匮乏。。。。 。。其中，，，，， ，，经典的C端建饰步骤重要为化学酶法，，，，， ，，必要在指标蛋白质的C端融合特定标签，，，，， ，，利用酶催化反映将合成的含有相应氨基酸序列的建饰片段共价偶联到蛋白质的C端，，，，， ，，拥有肯定的限度。。。。 。。另表，，，，， ，，基于化学伎俩的蛋白质C端建饰步骤还很不足。。。。 。。因而，，，，， ，，开发新型的、纯化学的、底物领域宽泛的C端建饰战术拥有沉要意思。。。。 。。
在此基础上，，，，， ，，中国科学院上海药物钻研所黄蔚课题组于2023年11月7日在Nature Communications颁发了题为“C-terminal modification and functionalization of proteins via a self-cleavage tag triggered by a small molecule”的钻研论文。。。。 。。
半胱氨酸蛋白酶结构域（CPD）已被宽泛用作蛋白质C端标签以提高指标蛋白的可溶性表白。。。。 。。与其他标签相比，，，，， ，，催化量的肌醇六磷酸（InsP6）即可实现CPD标签的脱除。。。。 。。结合前期工作，，，，， ，，钻研人员揣摩在CPD的自裂解过程中可能存在硫酯中央体。。。。 。。因而，，，，， ，，团队揣摩额表参与的氨基化合物可与硫酯中央体反映形成新的酰胺键，，，，， ，，在标签脱除的同时实现对蛋白质C端的衍生化。。。。 。。
在本钻研中，，，，， ，，科研人员首先从氨基化合物浓度、InsP6浓度、催化剂种类、缓冲溶液种类等多方面对反映前提进行了优化，，，，， ，，并对氨基底物以及蛋白底物进行了拓展，，，，， ，，转化率最高可达95%以上。。。。 。。钻研人员利用该战术实现了纳米抗体药物偶联物、纳米抗体糖/肽偶联物、双特异性抗体的造备以及抗体C端的荧光象征，，，，， ，，展示了该战术拥有宽泛的利用场景。。。。 。。
图1. 幼分子触发的蛋白质C端建饰及职能化
该步骤通过化学伎俩实现了蛋白的急剧职能化，，，，， ，，拥有无需酶催化、位点特异性好、建饰效能高、底物领域广蹬着点，，，，， ，，为当前蛋白C端建饰伎俩匮乏提供了有力的补充，，，，， ，，拥有较大的利用潜力。。。。 。。
图2. 新步骤拥有优良的蛋白质、氨基底物兼容性以及宽泛的利用场景
上海药物所博士钻研生曾悦、施伟副钻研员为论文共同第一作者，，，，， ，，唐峰钻研员为论文通讯作者，，，，， ，，黄蔚钻研员赐与了大力支持。。。。 。。本钻研得到了国度沉点研发打算项目、国度天然科学基金、上海视装扬帆打算”、中国科学院出格钻研助理项目、中国博士后科学基金、荆门创新创业辅导团队项目及临港尝试室等项主张基金支持。。。。 。。
