?超氧化物检测试剂盒 Superoxide Assay Kit

货号：ZK-PL3983

超氧化物检测试剂盒（Superoxide Assay Kit）是一种用于超氧化物急剧高活络检测的试剂盒。。。。。。。。超氧化物通常指超氧阴离子(superoxide anion)，，，，，，是一种氧分子的自由基，，，，，，在细胞内重要有NADPH氧化酶把电子传递给氧分子产生。。。。。。。。超氧阴离子是一种强氧化剂，，，，，，重要由中性粒细胞、巨噬细胞为代表的免疫细胞，，，，，，在各类应激前提下产生，，，，，，从而招架微生物的习染。。。。。。。。在病理前提下，，，，，，过度产生的超氧阴离子，，，，，，也会导致机体危险和引发各类疾病。。。。。。。。

道理：

本试剂盒利用超氧化物能够还原WST-1产生可溶性有色物质为基础来检测超氧化物。。。。。。。。试剂盒的检测试剂中增长了过氧化氢酶（Catalase）等，，，，，，能够断根过氧化氢等过氧化物对WST-1显色的滋扰，，，，，，使测定了局越发正确。。。。。。。。另表本试剂盒还提供了超氧化物歧化酶（SOD），，，，，，能够验证本试剂盒检测的是否为超氧化物，，，，，，以排除检测系统中其它可能存在的滋扰。。。。。。。。对于本试剂盒，，，，，，参与SOD通常浚？？？？？Ｄ芄灰衷90%以上的超氧化物。。。。。。。。

合用领域：

试剂盒组成：

（1）超氧化物检测缓冲液 50 ml/瓶        （2）WST-1溶液 1 ml/管

（3）Catalase溶液 200μl/管           （4）SOD溶液 50μl/管

贮存前提：

-20℃贮存，，，，，，一年有效

所需设备:

酶标仪，，，，，，最佳波长450nm

操作步骤：

1. 超氧化物检测工作液的配造：

凭据测定样本数量按下表所示比例配造超氧化物检测工作液。。。。。。。。

2. 细胞接种和孵育：取必要测定的细胞，，，，，，若是是悬浮细胞，，，，，，利用PBS洗涤一次，，，，，，再利用超氧化物检测缓冲液沉悬细胞，，，，，，调整到相宜浓度后，，，，，，接种100

μl到96孔板中（细胞数量请通过预尝试优化）；；；；；若是是贴壁细胞，，，，，，提前一天接种到96孔板中，，，，，，24幼时后吸去造就基，，，，，，利用PBS洗涤一次，，，，，，再参与100

μl超氧化物检测缓冲液。。。。。。。。而后参与相应的超氧化物检

测工作液配造的药物及超氧化物刺激剂（如PMA等），，，，，，在37℃造就箱孵育1幼时或经过优化的功夫。。。。。。。。

具体检测对照设置如下表所示：

3. 孵育实现后，，，，，，利用酶标仪测定A450nm。。。。。。。。若是样品吸光度过高，，，，，，可适当降低接种细胞数量或缩短孵育功夫后测定，，，，，，若是样品吸光度过低，，，，，，可适当增长

接种细胞数量或耽搁孵育功夫后测定。。。。。。。。

4、数据处置：

利用未加过问成分处置的样品和加了过问成分处置的样品吸光度减去空缺对照吸光度后，，，，，，推算过问成分对超氧化物产生的上调或下调比例。。。。。。。。

当苦衷项

1. WST-1溶液、Catalase溶液和SOD溶液请尽量预防反复冻融，，，，，，能够适当分装。。。。。。。。

2. 初次使用试剂盒时，，，，，，幼体积液体试剂请适当离心后使用。。。。。。。。

3. 初次测定超氧化物，，，，，，可取幼鼠骨髓细胞，，，，，，500000细胞/孔接种到96孔板中，，，，，，利用50ng/mlPMA刺激1幼时，，，，，，检测超氧化物作为阳性对照。。。。。。。。

4. 本产品仅限专业人员用于科学钻研，，，，，，不得用于临床诊断或医治，，，，，，不得用于食品或药品。。。。。。。。

5. 为了您的安全和健全，，，，，，请穿尝试服并戴一次性手套操作。。。。。。。。