?组织总铁离子含量检测试剂盒

货号：ZK-PL3974

规格：100次 300次

描述：

铁是人体必须的元素之一，，，，，，对人体的新陈代谢和身段健全拥有沉要作用，，，，，，血液中铁的含量不及，，，，，，就会造成缺铁性血虚。。。。。。。铁存在于人体所有的细胞内，，，，，，各组织、器官蕴含各内排泄腺都含有铁。。。。。。。肝脏、脾脏和肺组织内含量较为丰硕。。。。。。。成人体内含铁3～5克，，，，，，大部门都以蛋白质复合物大局存在，，，，，，极少部门以离子的状态存在。。。。。。。本试剂盒选取亚铁嗪比色法能够定量动物实体组织中铁离子，，，，，，线性领域5~300uM。。。。。。。产品蕴含尺度品和空缺对照，，，，，，本试剂盒可进行100个样品的检测。。。。。。。

道理：

铁与蛋白结合成复合物，，，，，，在酸性介质中铁从复合物中解离出来，，，，，，再被还原剂还原成二价铁，，，，，，并与亚铁嗪天生紫红色化合物，，，，，，在540-580nm处可比色测定。。。。。。。 其反映如下图所示：

组成：

1. 组织裂解液： 60 ml

2. 缓冲液： 5ml

3. 检测剂： 3ml

4. 尺度品： 1ml

5. 稀释用液： 20ml

贮存：4℃保留，，，，，，6个月有效。。。。。。。

合用领域：该试剂盒可用于动物实体组织中铁离子定量检测。。。。。。。

用户自备：4.5%高锰酸钾溶液5ml。。。。。。。（0.225g高锰酸钾溶化于5ml纯水中）

操作步骤：

1. 样品筹备：

离心管精确称沉，，，，，，参与组织块后再称沉，，，，，，二者相减(即减量称沉法)推算组织沉量(约20mg-50mg)。。。。。。。建议按比例每50mg组织加200?l-400?l裂解液。。。。。。。用电动高速匀浆器或手动玻璃匀浆器破碎组织（不推荐超声步骤，，，，，，因其不能齐全和均匀破碎。。。。。。。应凭据预尝试调整初始的组织参与量）。。。。。。。匀浆后置于摇床裂解2h，，，，，，之后室温12000rpm离心5分钟，，，，，，上层清液即可用于测定。。。。。。。

2. 尺度品的稀释：用试剂盒提供的稀释用液将3mM 的尺度品母液稀释为：300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。。。。。。。把稳倍比稀释并设置0浓度对照反映管。。。。。。。

3. 将缓冲液与4.5%高锰酸钾溶液按1:1混匀，，，，，，称为混液A。。。。。。。

4. 参考下表使用1.5ml离心管，，，，，，设置空缺对照管、尺度品管和样品管。。。。。。。若是样品中的铁元素含量过高，，，，，，用裂解液适当稀释后再进行测定。。。。。。。

5. 混匀，，，，，，60℃孵育1h。。。。。。。

6. 冷却至室温，，，，，，将管盖与管壁上的液滴离心入管底。。。。。。。

7. 参与30ul铁离子检测剂，，，，，，混匀，，，，，，室温孵育，，，，，，30min。。。。。。。此步可能产生络合物沉淀，，，，，，用移液器轻轻奏乐即可溶化，，，，，，若沉淀不溶，，，，，，12000rpm离心5分钟，，，，，，取上层清液即可。。。。。。。

8. 取200ul于96孔板，，，，，，在550nm测定吸光度。。。。。。。若是不能测定550nm，，，，，，也能够在540nm~580nm领域内检测。。。。。。。

9. 绘造尺度曲线并推算铁离子浓度。。。。。。。

注明：

1. 本试剂盒不受锰离子、镁离子、镍离子和锌离子等的滋扰。。。。。。。

3. 所测样本的值高于尺度曲线的上限，，，，，，应稀释样品后沉新测定。。。。。。。

4. 为了您的安全和健全，，，，，，请穿尝试服并戴一次性手套操作，，，，，，检测试剂有侵蚀性，，，，，，请幼心操作，，，，，，若失慎沾到皮肤上请顿时用净水冲刷干净。。。。。。。

5. 该试剂盒仅供科学钻研使用。。。。。。。