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?液体样本葡萄糖GLU含量测定试剂盒(氧化酶法)
货号:ZK-PL3924
规格:200次
500次
25000次
描述:葡萄糖可能为组织细胞提供能量。。。。。。。。生理性饥饿、剧烈运动、营养不良城市导致血糖降低,,,,,,,糖尿病、肥胖等疾病会使血糖升高。。。。。。。。选取氧化酶法进行葡萄糖含量测定,,,,,,,是世界卫生组织和中国《全国临床检验操作规程》推荐的临床血糖检测步骤。。。。。。。。本试剂盒对此法经过改进,,,,,,,使检测活络度比通常步骤提高约10倍,,,,,,,其检测下限为5~10?mol/L,,,,,,,线性领域在10~20000 ?mol/L。。。。。。。。合用于测定血液、细胞造就基内的低浓度葡萄糖含量,,,,,,,也胜任各类临床和基础尝试中对于葡萄糖含量的丈量。。。。。。。。
道理:凭据Trinder反映道理1,2,,,,,,,葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOD)作用下天生葡萄糖酸和过氧化氢(H2O2);;;;;;而后过氧化物酶(POD)催化过氧化氢,,,,,,,使色原物质(4-氨基安替比林)天生醌亚胺,,,,,,,色彩的深浅与葡萄糖浓度成正比。。。。。。。。
合用领域:测定人及动物血清、血浆、脑脊液、等样品中的葡萄糖含量
组成(200次):(1)1ml 葡萄糖尺度品10 mmol/L (相当于180 mg/100 ml) (2) 32 ml 试剂R1 (3) 8 ml 试剂R2
贮存前提:4 ?C 保留 6个月有效
所需设备:721、722型可见光分光光度计、酶标仪、生化分析仪。。。。。。。。最佳工作波长550-555nm,,,,,,,如仪器无此波长建议优先选用570、530、490nm。。。。。。。。
操作步骤:
一.工作溶液配造:按4:1比例,,,,,,,取8 ml试剂R1与2 ml试剂R2混合得到10 ml 工作溶液。。。。。。。。当天使用或4?C保留1周。。。。。。。。
二.尺度品稀释:10 mM葡萄糖尺度品用蒸馏水或与样本缓冲液一致的液体稀释为2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625?M。。。。。。。。把稳设置0浓度对照反映管。。。。。。。。由于葡萄糖测定反映的线性关系甚好且领域很宽,,,,,,,通常设置黑体象征的4管即可,,,,,,,通常不必要设置大于2~10mM的尺度管,,,,,,,以此得到的尺度曲线用来测定大于2 mM葡萄糖浓度通常不会失真。。。。。。。。世界卫生组织(WHO)推荐也可仅设置单一浓度的尺度管。。。。。。。。把稳:不能使用用户自己单一配造的葡萄糖尺度溶液。。。。。。。。
三、葡萄糖含量测定:
1. 拜见下表加样。。。。。。。。先加尺度品或待测样品,,,,,,,后加工作溶液。。。。。。。??????善揪萜咸烟桥ǘ劝纪刮⒘康髡酚牍ぷ饕禾寤壤。。。。。。。。超出线性领域可适当稀释。。。。。。。。
2. 37?C 反映20min (15~30min)或25?C室温反映30 min但活络度略降。。。。。。。。反映平衡后色彩在60 min内不变。。。。。。。。
3. 吓酌蒸馏水+工作液空缺管调零,,,,,,,而后测定各管OD值。。。。。。。。
4. 绘造尺度曲线并推算葡萄糖浓度。。。。。。。。
附Excel作图步骤:各尺度管OD值为y轴,,,,,,,浓度为x轴。。。。。。。。(1)鼠标左键圈住数据,,,,,,,点击做图向导,,,,,,,选择-散点图-,,,,,,,点击-实现-。。。。。。。。(2)鼠标右键点图上的某一点,,,,,,,点击-增长趋向线-,,,,,,,点击-选项-,,,,,,,点击-显示公式-和-R2值-。。。。。。。。
5. 若是仅用单一尺度管:葡萄糖浓度(mmol/L) = 尺度品浓度 × (样品管OD-空缺管OD) / (尺度管OD-空缺管OD)。。。。。。。。
加样表
(可微量调整样品与工作液体积比例)
96孔微板测试(反映体积200μl) | 比色杯测试(反映体积800 μl) | ||||||
空缺管 | 尺度管 | 样品管 | 空缺管 | 尺度管 | 样品管 | ||
蒸馏水μl | 5 | 蒸馏水μl | 20 | ||||
尺度品μl | 5 | 尺度品μl | 20 | ||||
标品 μl | 5 | 标品 μl | 20 | ||||
工作溶液μl | 195 | 195 | 195 | 工作溶液μl | 780 | 780 | 780 |
注明:
1. 人空腹血糖参考值3.89-6.11 mmol/L (70-110 mg/dl),,,,,,,低血糖症临界水平2.7-3.89 mmol/L,,,,,,,高血糖症临界水平6.11-7.22 mmol/L。。。。。。。。分歧单元之间的换算公式:1 mmol/L = 0.0555 mg/100 ml (dl);;;;;;1 mmol/L × 18 = 1 mg/100 ml (dl)。。。。。。。。
2. 检测线性领域0.02~20 mmol/L。。。。。。。。浓度超过20 mmol/L用蒸馏水或生理盐水稀释1-2倍后丈量。。。。。。。。批内变异系数为0.7~2.0%,,,,,,,批间变异系数为~2%。。。。。。。。正确杜纂精密度可达到临床检测要求。。。。。。。。
3. 不能用于直接测定尿液葡萄糖含量。。。。。。。。尿液中尿酸浓度比力高,,,,,,,会亏损葡萄糖氧化酶反映中产生的过氧化氢,,,,,,,降低呈色反映,,,,,,,从而引起负误差使了局偏低。。。。。。。;;;;;;乖晕镏嗜缒蛩帷⒖够笛帷⒌ê熘省⒐入赘孰目删赫魉鸱从巢墓趸,,,,,,,使测定了局偏低。。。。。。。。含强还原剂如二硫苏糖醇、巯基乙醇样品不建议使用本法。。。。。。。。本法反映终系统可容忍的滋扰物质最高浓度:血红蛋白10 g/L,,,,,,,黄疽标本胆红素340 μmol/L,,,,,,,氟化钠3 g/L,,,,,,,尿素46.7 mmol/L (280 mg/dl),,,,,,,尿酸2.95 mmol/L (50 mg/dl),,,,,,,肌酐4.42 mmol/L (50 mg/dl),,,,,,,半胱氨酸50 mg/dl,,,,,,,甘油三酯500 mg/dl。。。。。。。。
4. 《全国临床检验操作规程》指明测定血糖用草酸钾-氟化钠抗凝:每5ml血液加0.2 ml 6%草酸钾-4%氟化钠;;;;;;其利益是抑造糖酵解和分化,,,,,,,测得的葡萄糖浓度更靠近真实;;;;;;弊端是滋扰其它生化查抄项目。。。。。。。。枸椽酸钠抗凝剂易引起溶血,,,,,,,也滋扰很多生化查抄项目。。。。。。。。如必须用统一份标本做全套生化检测,,,,,,,可选取肝素钠抗凝剂。。。。。。。。
5. 血样应在30分钟内实现测定。。。。。。。。血清或血浆仍含大量血细胞,,,,,,,室温下糖酵解旺盛可亏损葡萄糖使丈量值降低。。。。。。。。室温搁置1幼时葡萄糖含量起头降低,,,,,,,3幼时后显著降落。。。。。。。。4 ?C保留血样,,,,,,,葡萄糖不变性显著增长。。。。。。。。使用血浆测定葡萄糖浓度可能更靠近真实浓度。。。。。。。。相比之下用血清标本测得的葡萄糖浓度偏低,,,,,,,且随着样品搁置功夫耽搁而显著降落。。。。。。。。
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