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膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液)
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膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液)

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?膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液)

货号:ZK-PL3704

规格: 100ml  500ml

描述:

膜再生液,,, ,,,,也称做抗体剥离液体、一抗二抗去除液。。。。 。允许对统一张膜进行屡次Western Blot检测。。。。 。在室温前提下,,, ,,,,将用过的膜浸泡在膜再生液中30分钟,,, ,,,,可能选择性断根与膜抗原结合的第一抗体及第二抗体,,, ,,,,但不影响电转移到膜上的蛋白。。。。 。随后能够使用分歧的抗体进行下一轮Western Blot尝试,,, ,,,,可利用统一张膜进行屡次蛋白检测。。。。 。不仅合合用少量样品屡次检测多种分歧蛋白,,, ,,,,即便样品量并不匮乏,,, ,,,,选取这种屡次检测统一张膜上的蛋白的战术,,, ,,,,能省去给药处置、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。。。。 。

特点:

(1)无毒无味无害,,, ,,,,室温保留和使用;;;;;;;;

(2)可对统一张膜进行10次以上的Western Blot检测。。。。 。

合用:

硝酸纤维素膜或PVDF膜。。。。 。使用前膜能够保留在PBS或TBS缓冲液,,, ,,,,也能够室温干燥保留数月。。。。 。

干的PVDF膜应该吓酌甲醇泡5分钟。。。。 。

安全性:

无毒无味。。。。 。依照通常化学品安全规范进行操作和措置。。。。 。


贮存:

室温保留,,, ,,,,一年有效。。。。 。温度过低可能出现浑浊。。。。 。


成效展示:

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第一次Western Blot 第一次Western Blot后用膜再生液处置,,, ,,,,而后进行第二次Western Blot

操作步骤:

1. 将膜充分浸泡于适当体积的再生液中,,, ,,,,室温孵育15~30分钟并不断晃悠。。。。 。孵育功夫的长短应参考后面的注明进行优化。。。。 。洗脱某些抗体必要较长的功夫如30~60分钟。。。。 。

2. 用镊子取出膜,,, ,,,,用自备Western Blot洗涤缓冲液或普利莱封关洗涤缓冲液淋洗膜一次,,, ,,,,再洗膜5分钟。。。。 。

3. 此时膜上抗体已去除,,, ,,,,膜已再生。。。。 。用脱脂奶粉或BSA封关,,, ,,,,进行下一轮Western Blot尝试。。。。 。

注明:

1. 膜再生或Stripping的内容是在不影响膜上结合的抗原的前提下,,, ,,,,将与抗原分子结合的一抗和二抗洗脱下来。。。。 。有很多成分影响抗体从膜上的洗脱,,, ,,,,如膜的类型、抗体类型和浓度及其与抗原结合个性等。。。。 。按下面的注明优化再生液中孵育膜的功夫至关沉要。。。。 。

2. 确定膜上抗体是否去除与优化再生液中孵育膜的功夫:用ECL工作液孵育再生后的膜约1分钟,,, ,,,,而后进行X光胶片曝光并显影,,, ,,,,可确定膜上的抗体是否齐全去除。。。。 。如显示条带,,, ,,,,批注抗体未齐全去除,,, ,,,,应持续将膜浸泡在再生液中孵育30~60分钟。。。。 。而后再次ECL 查抄膜上抗体是否去除。。。。 。沉复此步骤直到抗体齐全去除并确定最佳孵育功夫。。。。 。

3. 由于至今尚不明显的原因,,, ,,,,使用脱脂奶粉封关的膜要比使用BSA封关的膜上的抗体更容易被Strip下来。。。。 。因而筹备进行Strip的膜,,, ,,,,应该使用脱脂奶粉而不是BSA封关。。。。 。

4. 尽量预防使用干燥保留的膜,,, ,,,,由于干的膜上的抗体很难被Strip干净。。。。 。

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