?细菌总蛋白非变性提取试剂

货号：ZK-PL3510

产品描述：

细菌蛋白提取试剂Ⅰ(非变性)选取和善的非离子型去污剂，，，，，，可能从细菌中提获得到可溶性蛋白，，，，，，用细菌蛋白提取试剂Ⅰ(非变性)造备的蛋白产品维持了生物学活性，，，，，，合用于后续的Western Blot、免疫沉淀、免疫共沉淀、蛋白纯化等尝试。。。。。。。。

合用领域：

从新鲜或者冻存的细菌中提取蛋白。。。。。。。。

规格：

25ml 或 100mL.

贮存:

4℃保留 12个月有效

提取步骤：

1. 将细菌造就物在预先称沉的离心管中4?C，，，，，，5000g离心15分钟，，，，，，网络菌体；；；；；；；

2. 去上清，，，，，，称量菌体沉量，，，，，，依照每克菌体参与10-50ml细菌蛋白提取试剂Ⅰ(非变性)，，，，，，涡旋震荡使菌体齐全沉悬；；；；；；；

3. 室温孵育15-20分钟（孵育功夫可凭据细胞类型的分歧做调整)。。。。。。。。若是蛋白表白量低，，，，，，建议结合超声粉碎，，，，，，置冰上后，，，，，，选取300w,10s超声/10s距离,超声20min，，，，，，至菌液变清；；；；；；；若主张蛋白不不变，，，，，，可冰孵，，，，，，且功夫能够削减，，，，，，裂解液内参与0.2倍体积50%甘油也能够不变主张蛋白。。。。。。。。

4. 15000g，，，，，，离心10分钟；；；；；；；

5. 将上清转移至新的离心管中，，，，，，即得到可溶性蛋白，，，，，，可利用BCA法进行蛋白定量及后续尝试。。。。。。。。

把稳：

1. 该抽提试剂中不含有蛋白酶抑造剂，，，，，，用户可凭据具体情况增长蛋白酶抑造剂、还原剂、螯合剂等。。。。。。。。

2. 当提取物粘度较高或提取的蛋白以宽恕体大局存在时，，，，，，建议在参与溶菌酶和DNaseⅠ.

3. 若是在提取纯化过表白蛋白的过程中，，，，，，得到的大部门蛋白都在沉淀中，，，，，，那么主张蛋白可能以宽恕体的大局存在，，，，，，可使用宽恕体蛋白溶化液进行溶液，，，，，，也能够优化蛋白表白前提，，，，，，增长可溶性蛋白的表白。。。。。。。。