?液体样本??总蛋白提取试剂

货号：ZK-PL3505

规格：100次

描述：

本试剂盒可能在15分钟内对液体样品中的蛋白进行提取浓缩，，，，，，或脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。。。。。。。合用于各类液体样品(10?L～1L)，，，，，，如蛋白溶液、胞浆胞核蛋白提取液、细胞或微生物造就基上清液、血液、尿液、脑脊液等各类体液；；；；；；；；也适于从细胞悬液提取总蛋白。。。。。。。蛋白回收率95-100%，，，，，，远高于经典的丙酮或三氯醋酸沉淀法，，，，，，且可有效去除样品中的脂质，，，，，，不影清脆续SDS-PAGE和Western Blot等生物尝试。。。。。。。？？？？？？？捎1.5ml离心管微量提取也可大规模造备，，，，，，轻便高效。。。。。。。

组成和保留:

浓缩试剂50ml，，，，，，合用100x 100ml次浓缩提取。。。。。。。4℃保留 12个月有效

合用样品：

1. 液体样品如蛋白溶液、胞浆胞核蛋白提取液、细胞或微生物造就基上清液、血液、尿液、脑脊液等各类体液。。。。。。。2. 原代或传代细胞悬液，，，，，，可按液体方式提取总蛋白。。。。。。。

蛋白提取法式

微量提取加样量及比例 液体蛋白样品 (ml)     10      100      150

提取试剂 (ml)                                            50      500      750

H2O (ml)                                                  30      300      450

1. 每100ml液体蛋白样品，，，，，，按比例加5倍体积(500ml) 提取试剂，，，，，，振荡混匀，，，，，，室温静置3分钟。。。。。。。蛋白浓度较高时，，，，，，会很快产生凝聚导致溶液浑浊。。。。。。。

2. 10,000g 4℃离心3分钟。。。。。。。蛋白浓度较高时可省略此步骤。。。。。。。

3. 打开管口，，，，，，参与3倍体积(300 ml)的纯水，，，，，，振荡混匀。。。。。。。

4. 10,000g 4℃离心3分钟。。。。。。。溶液分为两相。。。。。。。蛋白在两相中央，，，，，，浓度高时会形成薄膜状或沉淀于管底；；；；；；；；浓度低时则肉眼难以看到。。。。。。。

5. 幼心汲取上层相，，，，，，弃去。。。。。。。把稳应该保留肯定量的上层相，，，，，，以免吸走中央相的蛋白膜。。。。。。。

6. 参与500 ml 无水乙醇，，，，，，振荡洗涤沉淀。。。。。。。10,000g 4℃离心2分钟。。。。。。。弃上清，，，，，，再次瞬时离心数秒并吸去管内液体。。。。。。。勿触动管底的蛋白沉淀(量少时沉淀不私见)。。。。。。。

7. 敞开管口，，，，，，空气天然干燥。。。。。。。

8. 凭据样品蛋白初始浓度，，，，，，加适量双蒸水或上样缓冲液，，，，，，95℃煮5分钟溶化蛋白沉淀。。。。。。。

把稳

1. 可室温操作。。。。。。。1 mg/ml总蛋白可被有效沉淀，，，，，，更低浓度的蛋白可参与白蛋白做载体援手沉淀。。。。。。。？？？？？？？捎行コ禾逖分械难(1M)、还原剂(1%巯基乙醇

或DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40、油脂等。。。。。。。若是上述成分浓度过高，，，，，，用水稀释后进行提取。。。。。。。干燥蛋白沉淀可4℃或－20℃持久保

存。。。。。。。

2. 血浆蛋白或疏水蛋白溶化较慢，，，，，，反复数次95℃煮并加以－20℃冻融可助溶。。。。。。。必要时4℃溶化过夜，，，，，，或用2% SDS溶化沉淀，，，，，，95℃煮，，，，，，而后离心去除不

溶化物。。。。。。。

3. 如定量蛋白应使用不含溴酚蓝的凝胶上样缓冲液溶化沉淀，，，，，，蛋白定量后再参与溴酚蓝。。。。。。。

4. 提取造就细胞总蛋白：用蒸馏水或1% SDS造备肯定体积的细胞悬液，，，，，，振荡裂解细胞，，，，，，而后执行上述液体样品蛋白提取法式。。。。。。。

5. 实体组织的蛋白提取可使用P1250实体组织和细胞蛋白抽提试剂盒。。。。。。。

6. 提取试剂有刺激性，，，，，，一旦接触立即用水洗濯。。。。。。。