?Western及IP裂解液

货号：ZK-PL3486

规格：100ml  500ml

描述：

IP裂解缓冲液，，，，，，，，为您提供齐全的组织、细胞总蛋白造备规划。。。。。

IP裂解缓冲液(C1054)能裂解细胞并在非变性前提下开释胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。。。。。非变性前提下的裂解蛋白产品最大限度地保留了蛋白的个性和职能，，，，，，，，如抗原-抗体结合能力或酶学活性，，，，，，，，因而合适于进行免疫共沉

规格：

100ml   500ml

造备细胞裂解产品：

1. 800g4℃离心5分钟网络造就细胞，，，，，，，，而后用预冷的PBS洗涤细胞两次。。。。。估计细胞离心后的体积（PCV,106cells=~20ul,107cells =~100ulPCV）；；；；；；；

2. 每50～100mlPCV参与5倍体积IP裂解缓冲液（250~500ml）,涡旋震荡10秒，，，，，，，，冰浴搁置20分钟；；；；；；；

3. 12000g4℃离心15分钟，，，，，，，，将上清转移到新的离心管中，，，，，，，，即得细胞总蛋白产品，，，，，，，，

造备组织裂解产品：

1. 取50-100mg组织在冰上剪成碎片，，，，，，，，用预冷的PBS洗涤2次离心弃去PBS；；；；；；；

2. 参与0.5-1ml预冷的IP裂解缓冲液；；；；；；；

3. 4℃用玻璃匀浆器匀浆20-40次，，，，，，，，直到95％的细胞被破碎，，，，，，，，涡旋震荡10秒，，，，，，，，冰浴搁置20分钟；；；；；；；

4. 12000g4℃离心15分钟，，，，，，，，将上清转移到新的离心管中，，，，，，，，即得组织总蛋白产品，，，，，，，，可用于后续的免疫沉淀或者Western Blot等尝试。。。。。

把稳：

1. 在转移上清液时不要吸入底部的沉淀物；；；；；；；

2. 在做免疫沉淀或免疫共沉淀时最好在尝试前进行蛋白的提取，，，，，，，，以预防某些不不变蛋白的降解；；；；；；；

3. 在该裂解缓冲液中未参与蛋白酶抑造剂，，，，，，，，用户可自行选择进行增长。。。。。