猫狂犬病毒抗体ELISA试剂盒

货号： ZK-C8102
品牌：乐投letou生物ZIKER；；；；；
检测步骤：酶联免疫分析检测法；；；；；
规格：48T/96T；；；；；
包装：盒；；；；；
有效期：6个月；；；；；
保留温度： 2-8℃;
利用领域：仅供科研钻研尝试使用，，，，，不成用于临床诊断使用；；；；；
可检测样品大局：血清/血浆/组织匀浆/细胞造就上清/有关生物液体。。。。。。。。
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样品网络、处置及保留步骤

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，，，，，操作过程中预防任何细胞刺激，，，，，网络血液后，，，，，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速幼心地分离。。。。。。。。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。。。。。。。。3000转离心30分钟取上清。。。。。。。。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。。。。。。。。

4.  组织匀浆：将组织参与适量生理盐水捣碎。。。。。。。。3000转离心10分钟取上清。。。。。。。。

5.  保留：若是样本网络后不实时检测，，，，，请按一次用量分装，，，，，冻存于-20℃，，，，，预防反复冻融，，，，，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。。。。。。。。

自备物品

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

操作当苦衷项

1.  试剂盒保留在2-8℃，，，，，使用前室温平衡20分钟。。。。。。。。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，，，，，这属于正常景象，，，，，水浴加热使结晶齐全溶化后再使用。。。。。。。。

2.  尝试中不用的板条应立即放回自封袋中，，，，，密封（低温干燥）保留。。。。。。。。

3.  预处置后的样本请依照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的最佳检测成效。。。。。。。。

4.  严格依照说明书中表明的功夫、加液量及挨次进行温育操作。。。。。。。。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。。。。。。。。

试剂盒组成

试剂的筹备

 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，，，，，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。。。。。。。。

洗板步骤

1.  手工洗板：甩尽孔内液体，，，，，每孔加满洗涤液，，，，，静置1min后甩尽孔内液体，，，，，在吸水纸上拍干，，，，，如此洗板5次。。。。。。。。

2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，，，，，浸泡1min，，，，，洗板5次。。。。。。。。

操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，，，，，渣滓板条用自封袋密封放回4℃。。。。。。。。

2.  设置阴、阳性对照孔和样本孔，，，，，阴、阳性对照孔中参与阴性对照、阳性对照各50μL；；；；；

3.  待测样本孔先加待测样本10μL，，，，，再加样本稀释液40μL；；；；；

4.  随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔参与辣根过氧化物酶（HRP）象征的检测抗原100μL，，，，，用封板膜封住反映孔，，，，，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。。。。。。。。

5.  弃去液体，，，，，吸水纸上拍干，，，，，每孔加满洗涤液，，，，，静置1min，，，，，甩去洗涤液，，，，，吸水纸上拍干，，，，，如此沉复洗板5次（也可用洗板机洗板）。。。。。。。。

6.  每孔参与底物A、B各50μL，，，，，37℃避光孵育15min。。。。。。。。

7.  每孔参与终止液50μL，，，，，15min内，，，，，在450nm波利益测定各孔的OD值。。。。。。。。

了局判断

 1.  试验有效性：阳性对照孔OD值均匀值≥1.00；；；；；

                         阴性对照孔OD值均匀值≤0.15。。。。。。。。

2.  临界值（Cut off）推算：临界值=阴性对照孔均匀值+0.15

3.  阴性判断：样品OD值＜临界值（Cut off），，，，，样品为阴性

4.  阳性判断：样品OD值＞临界值（Cut off），，，，，样品为阳性