WIP组织细胞裂解液

英文名称：WIP(Tissue and Cell lysis Reagent)
中文名称：WIP组织细胞裂解液
别    名：Tissue and Cell Lysis Reagent.  
规格：30ml  60ml  100ml
保留前提：-20°C保留，，，，，，，一年有效

产品介绍

一. WIP组织细胞裂解液使用说明书
产品简介
WIP组织细胞裂解液(Tissue and Cell lysis solution for Western Blot and Immunoprecipitation )，，，，，，，是一种在非变性前提下裂解细胞的裂解液。。。。。。。。本产品裂解细胞获得的裂解产品，，，，，，，可用于PAGE，，，，，，，蛋白印迹（Western Blot），，，，，，，免疫沉淀(immnolprecipitation，，，，，，，IP),免疫共沉淀(co-IP) 和蛋白与多肽的分离纯化。。。。。。。。
WIP裂解液的重要成分为Tris(pH 7.5，，，，，，，20mM)，，，，，，，150mM NaCl，，，，，，，去垢剂Triton X-100以及多种蛋白酶抑造剂,无需自备PMSF、磷酸酶抑造剂等蛋白酶抑造剂。。。。。。。。WIP不仅能够用于细胞造就物的裂解，，，，，，，也可直接用于大无数动物组织的裂解。。。。。。。。在有效地裂解组织和细胞的同时，，，，，，，可强烈地抑造蛋白、多肽的降解，，，，，，，并维持原有的分子结构和蛋白间相互作用。。。。。。。。
用WIP裂解得到的组织细胞蛋白样品，，，，，，，能够用博奥森出产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。。。。。。。。由于含有较高浓度的Triton X-100等滋扰物质，，，，，，，不能用Bradford试剂盒测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。。。。。。。。
包装清单
WIP组织细胞裂解液 30ml 
PMSF（100X） 0.3ml 
保留前提：
-20°C保留，，，，，，，一年有效。。。。。。。。 
当苦衷项：
1．为获得最佳的尝试成效，，，，，，，可适当分装使用，，，，，，，以尽量预防反复冻融。。。。。。。。
2．PMSF应现用现加。。。。。。。。
3．裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4°C进杏祝。。。。。。。
4．蛋白酶抑造剂均有较高的毒性，，，，，，，为了您的安全和健全，，，，，，，请穿尝试服并戴一次性手套操作。。。。。。。。一旦直接接触，，，，，，，请立即用流水冲刷，，，，，，，再向医疗保健结构征询。。。。。。。。

二.使用步骤注明
1．造就细胞
取出WIP裂解液，，，，，，，待消融后，，，，，，，颠倒混匀数次，，，，，，，适量分装冻存。。。。。。。。在使用前取出，，，，，，，按比例参与PMSF（使其最终浓度为1mM），，，，，，，混匀，，，，，，，立即便用。。。。。。。。
贴壁细胞，，，，，，，去除造就液，，，，，，，用PBS、生理盐水或无血清造就液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有滋扰，，，，，，，也能够不洗)。。。。。。。。按6孔板每孔参与100-200微升的比例参与WIP。。。。。。。。用枪奏乐数下，，，，，，，使WIP和细胞充分接触。。。。。。。。通常WIP接触细胞数秒后细胞就会被裂解。。。。。。。。
悬浮细胞，，，，，，，网络造就细胞，，，，，，，离心去除造就液，，，，，，，用PBS、生理盐水或无血清造就液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有滋扰，，，，，，，也能够不洗)，，，，，，，用手指把细胞使劲弹散，，，，，，，按6孔板每孔细胞参与100-200微升的比例参与WIP。。。。。。。。若是细胞数量较大，，，，，，，应按50-100万细胞/管分装或凭据细胞数量按比例增长WIP。。。。。。。。用手指轻弹管底以推进WIP和细胞充分接触，，，，，，，裂解齐全时应无显著的细胞颗粒。。。。。。。。
裂解物经10,000-14,000g离心3-5分钟，，，，，，，取上清，，，，，，，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。。。。。。。。
裂解液用量注明：通常6孔板每孔细胞参与100微升裂解液已经足够，，，，，，，但若是细胞密度极度高能够适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。。。。。。。。
2．组织样品
取Ep管，，，，，，，别离称沉象征，，，，，，，把组织剪切成幼块装入Ep管中，，，，，，，称沉。。。。。。。。按每20毫克组织加100-200微升的比例参与WIP(如裂解不齐全，，，，，，，能够适当增长WIP的用量；；；；；如必要的蛋白样品浓度较高，，，，，，，能够适当削减WIP的用量)。。。。。。。。用手握式电动组织细胞匀浆器匀浆约1分钟或直至充分裂解。。。。。。。。10,000-14,000g离心3-5分钟，，，，，，，取上清，，，，，，，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。。。。。。。。
若是组织样品自身极度藐幼。。。。。。。，，，，，，如淋巴细胞，，，，，，，可直接参与WIP裂解，，，，，，，通过振荡（Vortex）以使样品裂解齐全